ENTEROBACTERIAS
Las enterobacteriáceas (Enterobacteriaceae)
son una familia de bacterias Gram negativas que contiene más de 30 géneros y
más de 100 especies que pueden tener morfología de bacilos o cocos. Los
miembros de esta familia forman parte de la microbiota del intestino (llamados
coliformes) y de otros órganos del ser humano y de otras especies animales.
Algunas especies pueden vivir en tierra, en plantas o en animales acuáticos.
Sucumben con relativa facilidad a desinfectantes comunes, incluido el cloro.
Con frecuencia se encuentran especies de Enterobacteriaceae en la
bio-industria: para la fermentación de quesos y productos lácteos, alcoholes,
tratamientos médicos, producción de toxinas en el uso de cosméticos,
fabricación de agentes antivirales de la industria farmacéutica.
Clasificación científica:
Dominio: Bacteria
Filo: Proteobacteria
Clase: Gammaproteobacteria
Orden:
Enterobacteriales
Familia: Enterobacteriaceae
Características
En la definición clásica de una
Enterobacteriaceae se usan siete criterios básicos, adicional a la aparición de
nuevos métodos taxonómicos para incluir a ciertos géneros que no cumplen con
todos los siguientes criterios, pero que forman parte de esta familia:
·
Son bacterias gram negativas, la mayoría bacilos, otros
cocobacilos y otros pleomórficos.
·
No son exigentes, son de fácil cultivo.
·
Son oxidasa negativo (excepto Plesiomonas, que es oxidasa
positivo), es decir, carecen de la enzima citocromo oxidasa.
·
Son capaces de reducir nitrato en nitrito.
·
Son anaeróbicos facultativos.
Son fermentadores de carbohidratos en
condiciones anaeróbicas con o sin la producción de gas (en especial glucosa y
lactosa), y oxidadores de una amplia gama de substratos en condiciones
aeróbicas.2
Ecología
La mayoría de las especies pueden aislarse
del intestino del hombre y de otros animales, de allí su nombre enterobacteria
(del griego entéron, intestino. Pueden ser flora o ser transitorias en la
cavidad bucal, en las regiones húmedas de la piel, en especial el perineo, las
fosas nasales y las vías genitales femeninas. Son abundantes en la naturaleza,
en particular en medios húmedos y, por ser expulsadas por las heces, funcionan
como medidores epidemiológicos de salubridad e higiene poblacional.
En el intestino, representan una fracción
importante de la flora aeróbica, se encuentran en grandes números en el colon
(desde el ciego hasta el recto), donde contribuyen a la degradación de residuos
alimenticios y a la producción de gas intestinal como parte de la fermentación.
La especie Escherichia coli juega una función
importante en el control de otras especies intestinales, constituyendo cerca
del 80 por ciento de la flora aeróbica intestinal en una concentración
aproximada de 108 en la materia fecal. Otras especies de Enterobacteriaceae con
una presencia numerosa intestinal son Proteus y Klebsiella, mientras que otras
especies, como Citrobacter, Hafnia, Providencia y Enterobacter están presentes
de manera irregular.
En ciertas oportunidades, los comensales del
intestino pueden resultar patogénicos como oportunistas en infecciones
urinarias, pulmonía, septicemia o sobreinfecciones, en especial en
inmunosuprimidos, en el uso de ciertos antibióticos, desnutrición, etc.
Patogenia
La presencia de Enterobacteriaceae dentro del
organismo es anormal y determina la aparición de infecciones, cuya gravedad
depende del punto de entrada. Introducidas por los alimentos, provocan
problemas intestinales al adherirse y atravesar la barrera de la mucosa
gastrointestinal, manifestada por diarreas y deshidratación. Ciertas especies
provocan patologías específicas:
·
La especie Salmonella typhi es responsable de la fiebre tifoidea.
·
La especie Shigella dysenteriae es el agente responsable de la
disentería bacilar.
·
La especie Escherichia coli enterotóxica es responsable de la
gastroenteritis infantil.
·
La especie Yersinia pestis es responsable de la peste.
·
La especie Serratia marcescens usualmente causa infecciones
nosocomiales como resultado de tratamiento en un hospital.
Las Enterobacteriaceae incluyen a organismos
que resultan patógenos para el ser humano como la Escherichia coli o la
Salmonella, especialmente importantes en la mortalidad infantil en países en
desarrollo3 y patógenos para las plantas como Erwinia, en la mayor parte de los
casos causando infecciones oportunistas.
Todos los bacilos de Enterobacteriaceae son
resistentes a antimicrobianos comunes, tales como la penicilina, la meticilina y
la clindamicina, entre otros.
Aislamiento e identificación de
Enterobacteriaceae
Estas bacterias son bacilos Gram-negativos
anerobios facultativos. Carecen de la enzima citocromo oxidasa y por ellose
mencionan como oxidasa negativos. Frecuentemente son aislados a partir de
materia fecal en agar conteniendolactosa y un indicador de pH. Las colonias que
fermentan la lactosa producirán suficiente ácido para causar el vire delindicador.
CLASIFICACIÓN
DE LOS FACTORES DE PATOGENICIDAD
Fimbrias. Son apéndices que consisten de subunidades de proteínas que están ancladas ya sea en la membrana externa de las bacterias gramnegativas, o en la pared celular de las bacterias grampositivas. Las fimbrias pueden ser rígidas o flexibles. La función principal de las fimbrias es servir como soporte de las adhesinas, encargadas de reconocer a su receptor en la célula hospedera.
Adhesinas. Las adhesinas son, por lo general, lectinas (proteínas que tienen afinidad por los azúcares) y su función es la adherencia. La mayoría de las bacterias expresan más de un tipo de adhesinas. En algunos casos, la fimbria posee dos o más adhesinas distintas para dos o más receptores diferentes y se les llama adhesinas fimbriales. Las adhesinas que no están en fimbrias son denominadas adhesinas afimbriales y algunos ejemplos son: proteínas de membrana externa de las bacterias gramnegativas, ácidos lipoteicoicos de bacterias grampositivas, glucocalix, proteínas F y M de Streptococcus sp. y tienen como función unirse en forma estrecha a la célula hospedera.
Unión e internalización en células M. Las células M son células epiteliales especializadas, que representan el 10% del total de células presentes en las placas de Peyer. Están localizadas en el epitelio intestinal intercaladas con los enterocitos, justo por arriba de los nódulos linfáticos. La función principal de las células M es la absorción de partículas desde la luz gastrointestinal transportándola hacia la región vasolateral rica en linfocitos y otras células inmunes; además, debido a su bajo contenido en lisozima, pueden transportar antígenos con una casi nula degradación enzimática. Las células M son endocíticas por naturaleza de modo que las bacterias que se unan a ellas son internalizadas y transportadas al tejido linfoide. Algunas bacterias utilizan a las células M como puerta de entrada para llegar a los tejidos profundos.
Invasión bacteriana. Se define como el proceso por medio del cual un microorganismo penetra al citoplasma de células no fagocíticas (células epiteliales o endoteliales), se replica dentro de éstas, se propaga a células adyacentes y finalmente destruye a las células. Un patógeno intracelular es aquel microorganismo que se internaliza y se replica dentro de células fagocíticas profesionales (neutrófilos y macrófagos).
Movilidad bacteriana. Es la capacidad que tiene la bacteria de desplazarse de un lugar a otro por medio del flagelo, sin un sentido definido. Los flagelos son apéndices largos los cuales se encuentran fijos a la célula por uno de su extremos y libres por el otro. El filamento del flagelo bacteriano está compuesto de subunidades de una proteína denominada flagelina.
Quimiotaxis. Se define como la capacidad que tienen las bacterias de
moverse hacia una fuente de nutrimentos. Las superficies mucosas están
protegidas de la colonización bacteriana debido a que están siendo bañadas
constantemente con líquido y presentan movimiento rápido. En tales casos, la
bacteria móvil se dirige hacia la membrana mucosa, teniendo mayor posibilidad
de contactar la superficie mucosa, a diferencia de las bacterias inmóviles que
carecen de esta capacidad, apoyando esta idea se tiene que muchas de las
bacterias que colonizan el intestino delgado y la vejiga son móviles.
Proteasa contra IgA secretora
Proteasa contra IgA secretora
La
viscosidad de la mucina es causada en parte por las moléculas de
inmunoglobulina secretoria A (sIgA) que se unen simultáneamente a antígenos
bacterianos vía sus sitios de unión al antígeno y la interacción con la mucina
por medio de sus porciones Fc. Una estrategia bacteriana que es designada para
evitar ser atrapada en la capa de mucina es la producción de una enzima
extracelular que rompe la IgA humana en la región de la bisagra. Este
rompimiento separa la parte de la sIgA que se une a la bacteria de la parte que
interactúa con la mucina. La importancia de que ciertos géneros bacterianos
produzcan esta proteasa de sIgA radica en que dichas bacterias pueden colonizar
las superficies mucosas con mayor facilidad que aquellas que no producen la
proteasa de sIgA.
Mecanismos de captación de fierro
Mecanismos de captación de fierro
El
hierro es un factor importante para el crecimiento de la mayoría de las
bacterias. El mejor mecanismo por medio del cual las bacterias captan fierro
son los sideróforos, los cuales son compuestos de bajo peso molecular que
quelan (atrapan) fierro con alta afinidad. Existen tres tipos principales de
sideróforos: catecoles, hidroxamatos y un tercero que es una combinación de
ambos. Los sideróforos son producidos por la bacteria y excretados al medio en
el cual se unen al fierro y el complejo sideróforo-fierro se une a receptores
para sideróforo en la superficie bacteriana, una vez que se ha internalizado el
complejo sideróforo-fierro, éste es roto para que libere el fierro en el
interior de la bacteria. Algunas bacterias no solo producen sus propios
sideróforos sino también producen receptores capaces de unir sideróforos producidos
por otras bacterias.
Cápsula
Cápsula
La cápsula es una red de polímeros que
cubre la superficie de una bacteria. La mayoría de las cápsulas están
compuestas de polisacáridos. Si el polisacárido forma una capa homogénea y
uniforme alrededor del cuerpo bacteriano se le llama cápsula y si solo forma
una red de trabéculas o una malla alrededor de la bacteria se le llama
glucocalix. El papel de la cápsula bacteriana es proteger a la bacteria de la
respuesta inflamatoria del hospedero, esto es, activación del complemento y
muerte mediada por fagocitosis. La cápsula por si misma es menos probable que
sea opsonizada por C3b y la bacteria puede no ser ingerida por los fagocitos.
La cápsula constituye el llamado antígeno K (capsular).
Existen cápsulas que consisten en ácido hialurónico (un polímero de matriz extracelular) como el de Streptococcus pyogenes o de ácido siálico (un componente común de las glucoproteínas de la células) se encuentra en algunas cepas de Neisseria meningitidis. Este tipo de cápsulas son no inmunogénicas y el hospedero no produce anticuerpos que opsonicen la superficie capsular.
Variación en los antígenos de superficie
Existen cápsulas que consisten en ácido hialurónico (un polímero de matriz extracelular) como el de Streptococcus pyogenes o de ácido siálico (un componente común de las glucoproteínas de la células) se encuentra en algunas cepas de Neisseria meningitidis. Este tipo de cápsulas son no inmunogénicas y el hospedero no produce anticuerpos que opsonicen la superficie capsular.
Variación en los antígenos de superficie
Una
forma de evadir la acción de los anticuerpos del hospedero es cambiar de un
tipo de fimbria a otra, por lo tanto los anticuerpos preformados no se unen a
la nueva fimbria formada. La bacteria también cambia otras proteínas de
superficie que pueden servir como blanco para los anticuerpos. Algunas
bacterias encapsuladas están compuestas de polisacáridos que no desencadenan la
formación de anticuerpos porque dichos polisacáridos se parecen mucho a
carbohidratos que son ubicuos en los tejidos del hospedero (ácido siálico y
ácido hialurónico).
MEDIO DE
CULTIVO
Un medio de
cultivo consiste en un gel o una solución que cuenta con los nutrientes
necesarios para permitir (bajo condiciones favorables de pH y temperatura) el
crecimiento de virus, microorganismos, células o incluso pequeñas plantas.
Según qué se quiera hacer crecer, el medio requerirá unas u otras condiciones.
Generalmente se presentan desecados en forma de polvo fino o granular antes de
ser preparados, al prepararse podemos encontrarlos en estado sólido, semisólido
y líquido. El objetivo último del cultivo es variado: antibiograma, identificación,
multiplicación...
Medios de cultivo: Agar TSI (triple azúcar
hierro), agar LIA (lisina, hierro,
agar) agar UREA, agar CITRATO DE
SIMMONS, caldo MR (rojo metilo), caldo VP (voges proskauer), caldo
FENIL ALANINA-malonato,
medio SIM (sulfuro, indol, movilidad), medio
OF GLUCOSA (oxidación, fermetación).
PRUEBAS BIOQUIMICAS
Las pruebas bioquímicas se basan en la
determinación de la presencia o ausencia de diferentes enzimas codificadas por
el material genético del cromosoma bacteriano. Estas enzimas (catalasas,
coagulasas, decarboxilasas, deaminasas, ureasas, peroxidasas, etc) involucradas
en el metabolismo bacteriano, pueden ser evidenciadas en medios de cultivo especiales
que contienen los substratos (DNA, hidratos de carbono, aminoácidos, etc) sobre
los cuales ellas actúan, junto con un sistema indicador que va a poner de
manifiesto la degradación del substrato
o la presencia de un metabolito específico (ácido fórmico, ácido láctico, ácido
succínico, indol, etc).
Las pruebas bioquímicas también evalúan: la
capacidad de reducir ciertos iones (ferroso a férrico), la presencia o ausencia
de flagelos (prueba de movilidad), la producción o no de hemolisinas, el
requerimiento o no de algunos factores especiales (proteínas séricas), la producción
o no de algunas toxinas con capacidad virulenta (toxina diftérica, toxina botulínica,
etc).
BACTERIAS MÁS REPRESENTATIVAS
·
La especie Salmonella typhi
·
La especie Shigella dysenteriae
·
La especie Escherichia coli enterotóxica
·
La especie Yersinia pestis
·
La especie Serratia marcescens
